Partículas subvisibles en inyectables: criterios analíticos y cumplimiento de la Farmacopea Argentina
Análisis de los requisitos de la Farmacopea Argentina para partículas subvisibles en inyectables, incluyendo preparación de muestras, criterios de aceptación, limitaciones analíticas y aplicaciones del HIAC 9703+.
Partículas subvisibles en inyectables: criterios analíticos y cumplimiento de la Farmacopea Argentina
13 oct. 2026 15 min de lectura
Análisis de los requisitos de la Farmacopea Argentina para partículas subvisibles en inyectables, incluyendo preparación de muestras, criterios de aceptación, limitaciones analíticas y aplicaciones del HIAC 9703+.
Control de partículas subvisibles en inyectables: criterios analíticos y cumplimiento de la Farmacopea Argentina
El control de partículas subvisibles en medicamentos inyectables exige más que el
recuento instrumental de partículas en líquidos
. La selección del procedimiento, la preparación de las muestras, la adecuación del sensor y la interpretación de los resultados deben ajustarse a las especificaciones farmacopeicas aplicables.
Para los laboratorios de control de calidad, aplicar estos requisitos implica decisiones que pueden afectar directamente la confiabilidad de los resultados y la evaluación de conformidad de un lote. Estas actividades también forman parte de las Buenas Prácticas de Fabricación supervisadas por ANMAT, que abarcan documentación, calificación de equipos y procedimientos de control de calidad.
1. Aplicabilidad del capítulo 650: ¿cómo definir el procedimiento para cada preparación?
El capítulo <650> distingue entre preparaciones inyectables de pequeño y gran volumen y describe condiciones específicas de ejecución de los ensayos. Para seleccionar el procedimiento deben considerarse el volumen declarado, la presentación farmacéutica y la monografía correspondiente.
Para el ensayo por bloqueo de luz, el capítulo considera inyectables de gran volumen aquellos cuyo volumen declarado es igual o superior a 100 mL. Las preparaciones con un volumen declarado inferior a 100 mL se clasifican como inyectables de pequeño volumen.
Volumen declarado y muestreo
Para inyectables de pequeño volumen con menos de 25 mL por unidad, el procedimiento por bloqueo de luz contempla la posibilidad de combinar el contenido de diez o más unidades para obtener un volumen suficiente para el ensayo.
La necesidad de combinar unidades pone de manifiesto una de las dificultades de los análisis con volúmenes reducidos. Un estudio sobre reducción del volumen de muestra por Light Obscuration, presentado por INNOTEC, investigó cómo los distintos volúmenes influyen en el desempeño analítico del método.
Para preparaciones con 25 mL o más por unidad, el análisis puede realizarse individualmente. Los inyectables de gran volumen deben ensayarse en unidades individuales.
El número de unidades analizadas debe permitir una evaluación estadísticamente válida cuando el objetivo sea caracterizar un lote. El capítulo recomienda que los planes de muestreo consideren el historial de recuentos, la distribución de tamaños y la variabilidad entre unidades.
Formulaciones y condiciones particulares
Las preparaciones multidosis, los polvos estériles y los productos liofilizados requieren atención a las instrucciones específicas de preparación y cálculo.
El capítulo también establece condiciones particulares de aplicabilidad y contempla una exención para los inyectables cuya etiqueta indique que el producto debe utilizarse con filtración. Esta disposición no debe generalizarse a otras presentaciones.
Antes de realizar el ensayo, es necesario revisar el capítulo general, la monografía del producto y los requisitos específicos aplicables al medicamento.
2. Preparación de muestras: condiciones que pueden comprometer el recuento
Las partículas procedentes de los recipientes, los materiales de manipulación, el agua utilizada en el ensayo o el propio sistema de medición pueden interferir en la determinación.
Por este motivo, el capítulo <650> establece procedimientos de limpieza y control de las condiciones analíticas antes del recuento de las muestras.
Control del blanco en el método por bloqueo de luz
El procedimiento descrito en la Farmacopea Argentina utiliza 50 mL de agua destilada o desionizada y filtrada para verificar el blanco.
Tras la preparación y desgasificación, se realizan tres recuentos consecutivos utilizando porciones de al menos 5 mL. Se descarta el primer recuento.
El capítulo establece los siguientes criterios para la muestra combinada de 10 mL correspondiente a los dos recuentos considerados:
Clase de tamaño
Criterio para el blanco
Partículas ≥ 10 µm
No más de 10 partículas en 10 mL
Partículas ≥ 25 µm
No más de 2 partículas en 10 mL
Si se superan estos valores, el capítulo considera que las condiciones no son adecuadas para el ensayo. Debe revisarse la preparación y repetirse las verificaciones hasta alcanzar condiciones apropiadas.
Homogeneización y eliminación de burbujas
Para las preparaciones comprendidas en el procedimiento por bloqueo de luz, la Farmacopea Argentina describe la inversión del recipiente veinte veces para resuspender las partículas.
Las burbujas pueden eliminarse mediante sonicación durante aproximadamente 30 segundos o dejando reposar la muestra, según las condiciones descritas en el capítulo.
La muestra debe manipularse cuidadosamente para evitar introducir nuevas partículas o burbujas antes del recuento.
Alícuotas y volumen efectivamente analizado
El procedimiento farmacopeico de bloqueo de luz utiliza al menos tres alícuotas, cada una con un volumen no inferior a 5 mL. Se descarta el primer recuento y se utilizan los resultados restantes para los cálculos.
En las muestras combinadas, el volumen total debe ser suficiente para cumplir las condiciones de preparación y ejecución establecidas en el capítulo.
Es importante distinguir el volumen mínimo previsto en el procedimiento farmacopeico de la capacidad de un instrumento para trabajar con volúmenes menores mediante otros métodos analíticos.
3. Límites de aceptación para partículas de 10 µm y 25 µm
El capítulo <650> presenta criterios de aceptación para las clases de partículas de tamaño igual o superior a 10 µm y de tamaño igual o superior a 25 µm.
Los límites varían según el método utilizado y la clasificación de la preparación como inyectable de pequeño o gran volumen.
Límites para el recuento por bloqueo de luz
La Tabla 1 del capítulo <650> presenta los siguientes límites máximos:
Preparación
≥ 10 µm
≥ 25 µm
Inyectables de pequeño volumen
6.000 partículas/unidad
600 partículas/unidad
Inyectables de gran volumen
25 partículas/mL
3 partículas/mL
Límites para el recuento microscópico
Para el procedimiento de recuento microscópico, la Tabla 2 del capítulo establece límites diferentes de los aplicables al bloqueo de luz.
Preparación
≥ 10 µm
≥ 25 µm
Inyectables de pequeño volumen
3.000 partículas/unidad
300 partículas/unidad
Inyectables de gran volumen
12 partículas/mL
2 partículas/mL
Los valores presentados corresponden a las tablas oficiales del capítulo <650>, disponibles en el portal de legislación de la República Argentina.
Los criterios de un método no deben aplicarse a los resultados obtenidos mediante el otro. También es necesario verificar la monografía del producto y los posibles requisitos específicos.
4. Cálculo y expresión de los resultados: ¿dónde pueden producirse errores de interpretación?
Los resultados instrumentales deben convertirse a la unidad exigida por el procedimiento farmacopeico.
Un recuento obtenido en una alícuota de 5 mL no representa automáticamente el recuento por recipiente ni por mililitro de la preparación.
Preparaciones de pequeño volumen
En las muestras combinadas, el resultado por unidad depende del promedio de los recuentos considerados, el volumen total de la mezcla, el volumen de cada alícuota y el número de unidades agrupadas.
Para unidades individuales, el cálculo considera el promedio de los recuentos y la relación entre el volumen de la unidad y el volumen efectivamente analizado.
Preparaciones de gran volumen
Para inyectables de gran volumen, el promedio de los recuentos se divide por el volumen de la alícuota analizada, obteniéndose el resultado en partículas por mililitro.
Presentaciones multidosis
El capítulo establece que el resultado debe considerar el volumen correspondiente a la dosis máxima declarada en la etiqueta, siguiendo las instrucciones de cálculo aplicables.
El laboratorio debe asegurarse de que los cálculos utilizados en el software o en la hoja de resultados reproduzcan correctamente las condiciones del procedimiento adoptado.
5. Limitaciones del bloqueo de luz: ¿cuándo debe considerarse la microscopía?
El bloqueo de luz es el procedimiento descrito inicialmente en el capítulo <650> para evaluar las formulaciones a las que se aplica el método.
Sin embargo, determinadas características de la muestra pueden comprometer la idoneidad de la técnica.
Transparencia, viscosidad y características de la matriz
El capítulo advierte que los productos cuya transparencia o viscosidad no sean similares a las del agua pueden producir resultados incorrectos cuando se analizan por bloqueo de luz.
En determinadas situaciones puede utilizarse el procedimiento microscópico. Cuando la viscosidad impide una ejecución adecuada, el capítulo también contempla la dilución cuantitativa con un diluyente apropiado.
En estos casos, la dilución debe tenerse en cuenta al determinar el resultado final.
Concentración de partículas y limitaciones del sensor
La selección del sensor debe considerar su límite de concentración y su rango dinámico de medición.
El capítulo establece que el límite de concentración certificado por el fabricante debe ser superior a la concentración de partículas de la muestra analizada.
La presencia simultánea de partículas en la región de detección puede provocar coincidencia de pulsos y comprometer el recuento. Por ello, operar dentro de las condiciones especificadas para el sensor es necesario para la confiabilidad analítica.
Resultados superiores al límite por bloqueo de luz
El capítulo describe el paso al ensayo microscópico cuando la formulación no cumple las especificaciones del bloqueo de luz.
El método microscópico comprende la recolección de partículas sobre una membrana filtrante y su evaluación conforme a criterios específicos. El procedimiento excluye determinados materiales amorfos, semilíquidos o con aspecto de película, según lo descrito en la Farmacopea.
Esto significa que los métodos no son analíticamente idénticos y sus resultados no deben considerarse intercambiables.
Un resultado fuera de especificación también debe tratarse conforme a los procedimientos de investigación de desviaciones y resultados fuera de especificación del sistema de calidad del laboratorio.
6. HIAC 9703+: aplicación instrumental en el control de partículas subvisibles
El
HIAC 9703+
, de
Beckman Coulter
, es un sistema de recuento de partículas en líquidos desarrollado para aplicaciones farmacéuticas, incluido el análisis de productos parenterales.
El equipo utiliza sensores ópticos por bloqueo de luz y puede integrarse con el software PharmSpec para ejecutar ensayos, adquirir datos y gestionar resultados.
Selección de sensores y condiciones operativas
El HIAC 9703+ admite distintas configuraciones de sensores de la familia HRLD, con rangos de detección específicos.
Para el ensayo, la selección debe considerar las clases de tamaño exigidas, las características de la preparación, el límite de concentración del sensor y las condiciones de operación.
Los sensores y parámetros utilizados deben estar debidamente calificados y calibrados para la aplicación prevista.
Procedimientos farmacopeicos compatibles
Beckman Coulter informa que el HIAC 9703+ con PharmSpec admite los métodos de bloqueo de luz descritos en:
USP <787>:
determinación de partículas subvisibles en inyectables de proteínas terapéuticas.
Estos recursos son relevantes para laboratorios que trabajan con distintos compendios, pero la aplicación del capítulo argentino <650> exige verificar la correspondencia de los procedimientos, criterios y cálculos utilizados.
Volumen reducido de muestra: capacidad instrumental y exigencia farmacopeica
El HIAC 9703+ dispone de recursos para analizar volúmenes reducidos de producto, según la configuración y el procedimiento utilizado.
Sin embargo, que un equipo permita realizar análisis con 1 mL no modifica automáticamente el volumen previsto en el capítulo argentino <650>.
El uso de volúmenes menores debe evaluarse dentro del método específico, considerando su idoneidad analítica y los requisitos regulatorios aplicables.
Trazabilidad e integridad de datos con PharmSpec
El software PharmSpec ofrece funciones de control de acceso, autenticación de usuarios, registros de auditoría y almacenamiento protegido de datos.
Según Beckman Coulter, estas funciones ayudan a implementar requisitos relacionados con la integridad de los datos y la
21 CFR Part 11
.
El software también permite configurar procedimientos de ensayo y rutinas automatizadas de evaluación de resultados, incluidas funciones de cálculo y clasificación de conformidad según los módulos utilizados.
La disponibilidad de estas funciones no sustituye la calificación del sistema informatizado, la definición de permisos, la validación de procedimientos ni los controles del sistema de calidad.
7. Documentación analítica: ¿qué evidencias respaldan la conformidad del ensayo?
En la rutina de control de calidad, la conformidad no depende únicamente del resultado final, sino también de las evidencias que demuestran la ejecución adecuada del método.
Estas evidencias deben permitir reconstruir las condiciones del análisis, verificar los cálculos e identificar posibles desviaciones.
La siguiente tabla organiza aspectos relevantes para revisar el procedimiento analítico y sus registros. Es una matriz de apoyo técnico, no una lista de verificación oficial emitida por ANMAT.
Aspecto
Verificación técnica
Referencia normativa
Capítulo, edición, suplementos y monografía aplicables.
Plan de muestreo
Número de unidades y justificación estadística.
Preparación da amostra
Volumen, homogeneización, diluciones y prevención de la contaminación.
Control del blanco
Resultados y cumplimiento de los criterios definidos.
Sistema de medición
Sensor, rango dinámico, calibración y calificación.
Resultados
Recuentos considerados, cálculos, unidades y límites aplicados.
Integridad de los datos
Registros originales, trazabilidad, revisiones y control de cambios.
Desviaciones
Investigación, justificaciones técnicas y documentación de las decisiones.
El capítulo <650> proporciona la base del procedimiento analítico, pero su ejecución en un entorno farmacéutico regulado también depende de los procedimientos operativos, las prácticas de calificación y las responsabilidades establecidas en el sistema de calidad.
Conclusión: la conformidad depende de la aplicación correcta del método
La determinación de partículas subvisibles en medicamentos inyectables exige prestar atención a la aplicabilidad del procedimiento, la preparación de las muestras, los límites instrumentales y la expresión de los resultados.
El capítulo <650> de la Farmacopea Argentina establece criterios específicos para el recuento por bloqueo de luz y microscopía. Su aplicación exige verificar las características de la preparación y la adecuación del procedimiento al producto analizado.
Sistemas como el HIAC 9703+, de Beckman Coulter, pueden integrarse en estas rutinas de control de calidad y ofrecer recursos instrumentales para el recuento de partículas en líquidos y herramientas de gestión de datos analíticos.
INNOTEC es distribuidora exclusiva de la línea de recuento de partículas Beckman Coulter en Argentina y ofrece información técnica sobre el HIAC 9703+ y sus aplicaciones en laboratorios farmacéuticos.
